◆這款胎牛血清的試用范圍?適用于一般細胞,腫瘤細胞,部分干細胞等。◆如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?血清解凍時應(yīng)將血清從-15~-70℃的低溫冰箱中取出放入4℃冰箱解凍1天,待全部解凍后再分裝。解凍過程中請不時搖勻(小心勿造成氣泡),使血清成分和溫度均勻,從而減少沉淀的產(chǎn)生。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍,并避免反復(fù)凍融。需要長期保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。切勿將血清在 37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會被破壞,而影響血清質(zhì)量。◆有時在血清中見到的絮狀沉淀可能是些什么物質(zhì)?主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量,可用400 xg離心5 min去除,也可不用處理。◆如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?(1)解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。(2) 血清分裝凍存時,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。(4) 勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。(6) 若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。◆在使用前是否需要對血清進行過濾?一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清。◆自然溶化好的胎牛血清放在室溫下一晚還能用嗎?室溫不可以,建議4℃保存。◆加到培養(yǎng)基中的血清必須滅活嗎?不是必須的,看做什么實驗。如果用于培養(yǎng)普通細胞,血清一般是不需要滅活的,這樣可以有效保存血清中的生長因子。但是如果用于培養(yǎng)一些表面具有補體受體的細胞,如內(nèi)皮細胞,血清是需要滅活,一般是56℃,30min。◆熱滅活對血清的作用是什么?熱滅活步驟能夠滅活補體系統(tǒng)。補體會參與以下事件中:溶解細胞事件,平滑肌收縮,肥大細胞與血小板釋放組胺,吞噬作用增強,趨化作用,淋巴細胞與巨噬細胞的活化等。◆細胞培養(yǎng) 中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理?一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài),黑點是否游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細胞,生長狀態(tài)良好,與黑點出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):(1)細胞生長過老,破碎的細胞殘骸;(2)血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的結(jié)果;(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細胞生長;(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格??蓱?yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點;(5)培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點,可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。◆細胞培養(yǎng)中如何防止黑點生成?(1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù)。(2) 培養(yǎng)基無需37℃水浴。(3) 培養(yǎng)基保持最佳PH值7.0- 7.2。(4) 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),容器定期刷洗。(5) 掌握細胞傳代的最佳時機,細胞切勿生長過老。