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NEB/SNAP-Vista? Green/S9147S/50 nmol

價格: ￥3684.00 市場價: 6140.00

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貨號: S9147S-50nmol

品牌: NEB

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- Description:
  SNAP-Vista??GreenisagreenfluorescentsubstratethatcanbeusedtolabelSNAP-tag^?fusionproteins(incelllysatesorpurifiedproteins)fordetectionbySDS-PAGE.Thissubstrate(BG-VistaGreen)isbasedonfluoresceinandisoptimizedforexcitationwiththe488nmlaserexcitationlineinalaserbasedgelscanner.Itcanalsobeexcitedusing360nmlightfromastandardUV-transIlluminator.Ithasanexcitationmaximumat500nmandemissionmaximaat524nm.Thispackageincludes50nmolofSNAP-VistaGreensubstrate,sufficienttolabelonehundred20μlsamplescontainingSNAP-tagfusionproteinforin-geldetection.?
  
  TheSNAP-tagproteinlabelingsystemenables?thespecific,covalentattachmentofvirtuallyany?moleculetoaproteinofinterest.TheSNAP-tag?isbasedonhumanO⁶-alkylguanine-DNA-alkyltransferase?(hAGT).SNAP-tagsubstratesare
  fluorophores,biotinorbeadsconjugatedtoguanine?orchloropyrimidineleavinggroupsviaabenzyl?linker.Inthelabelingreaction,thesubstitutedbenzyl?groupofthesubstrateiscovalentlyattachedtothe?SNAP-tag.
  
  Therearetwostepstousingthissystem:subcloningandexpressionoftheproteinofinterestasaSNAP-tagfusion,andlabelingofthefusionwiththeSNAP-tagsubstrateofchoice.ExpressionofSNAP-tagfusionproteinsisdescribedinthedocumentationsuppliedwithSNAP-tagplasmids.ThelabelingofthefusionproteinswiththeSNAP-tagsubstratefordetectionbySDS-PAGEisdescribedinthisdocument.
  
  Figure1:?Excitation(dottedline)andemissionspectraofSNAP-VistaGreencoupledtoSNAP-taginbufferatpH7.5.
  Figure2:?TypicalSDS-PAGEgelfromagelscanner(MolecularDynamicsStormImager,488nmexcitation)
  Lane1fluorescentMWMarker?
  Lane2-4SNAP-His(22kD)0.1,0.5,1.0μg?
  Lane5-7SNAP-CyA(40kD)0.1,0.5,1.0μg?
  Lane8-10MBP-SNAP(63kD)0.1,0.5,1.0μg
  Figure3:StructureofSNAP-VistaGreen(MW628.6g/mol)
  Notes:
  Storage:Storesubstrateat-20°C.AfterdissolvingSNAP-VistaGreenstoreitinaliquotsat-20°Cinthedarkforuptothreemonths.Onceanaliquotisthaweditcanbestoredat4°Cinthedarkforuptotwoweeks.Makesuresubstrate,whichmayprecipitateduringfreezing,iscompletelyredissolvedbeforeuse.Withproperstorageat-20°C,thissubstrateshouldbestableforatleastthreeyearsdry,orthreemonthsdissolvedinDMSO.
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